Spoľahlivosť testov HIV: čo ich určuje, načasovanie testovania. HIV PCR analýza

Rýchly (bodový) alebo rýchly test na HIV je možné vykonať mimo špecializovaných laboratórií, nevyžaduje žiadne vybavenie a výsledky sú známe maximálne do 30 minút. Niektorí odborníci sú však k tejto diagnostickej metóde skeptickí, pričom upozorňujú na pochybnú spoľahlivosť a presnosť rýchleho testu HIV.

Indikácie pre rýchly test HIV a kde to urobiť

Primárne indikácie pre rýchle testovanie HIV, ktoré dokáže odhaliť infekciu doma, zahŕňajú prípady spojené so zvýšeným rizikom infekcie:

po urgentnej (neplánovanej) transfúzii krvi;
v prípade sexuálneho násilia alebo sexuálneho kontaktu s možným nosičom tohto vírusu;
keď sa zdravotnícky pracovník dostane do kontaktu s krvou pacienta s AIDS (počas diagnostických postupov alebo chirurgických zákrokov).

Potreba vykonať tento test vzniká, ak sa pacient sťažuje na výrazný bezpríčinný úbytok hmotnosti alebo horúčku, ktorá dlho neustupuje (a ošetrujúci lekár objaví zväčšené lymfatické uzliny).

Testy vrátane rýchlotestov je možné absolvovať najskôr 3 mesiace po podozrení na infekciu. Opakované testy sa vykonávajú každé 3 mesiace počas 1 roka.

Rýchle rýchle testovanie sa používa, keď táto analýza nie je k dispozícii z dôvodu nedostatku špecializovaných laboratórií.

Okrem toho sa rýchly test HIV používa na skríning rizikových skupín na účely dohľadu medzi určitými kategóriami populácie so zvýšenou pravdepodobnosťou infekcie týmto vírusom. V tomto prípade, ako aj pri kontakte s ktorýmkoľvek Centrom prevencie AIDS, sa bezplatne vykonáva rýchly test na HIV.

Kde môžem urobiť rýchly test na HIV?

Na stanovenie vírusu imunodeficiencie a protilátok existujú špecializované laboratóriá na diagnostiku infekcie HIV, ktoré majú právo vykonávať tieto štúdie a majú príslušnú akreditáciu.

Rýchly test na HIV v lekárňach

Rýchly test HIV si môžete zakúpiť v lekárňach, ktoré najčastejšie ponúkajú:

Cito test HIV 1/2 (Pharmasco), Vikia HIV 1/2 (BioMerieux) - rýchly imunochromatografický test (ICA), ktorý zisťuje prítomnosť protilátok proti HIV typu 1 a 2 v krvi, sére a plazme;
rýchly test na HIV v slinách – OraQuick HIV-1/2 Rýchly test protilátok alebo rýchly test na HIV OraQuick Advance (citlivosť viac ako 94 %); výrobca – OraSure Technologies (USA). Mnoho ľudí to nazýva domácim rýchlym testom na HIV, pretože na jeho vykonanie nie je potrebné odobrať krv zo žily (ako sa to robí v laboratóriách) alebo z prsta (prepichnutím vertikutátorom – ako pri vedení Cito). test HIV 1/2), keďže biomateriálové sliny sa používajú na kontrolu prítomnosti/neprítomnosti vírusu;
rýchly test na HIV Abon Biopharm – Abon HIV 1/2/0 Tri-Line Rapid Test (výrobca – Abon Biopharm Hangzhou Co., Čína).

Na takéto rýchle testovanie nie je potrebná žiadna špeciálna príprava a ako používať rýchly test HIV je podrobne vysvetlené v podrobných pokynoch priložených k špecifickej testovacej súprave, ktoré treba presne dodržiavať.

Rýchly test HIV 4. generácie - napríklad OnSite HIV Ag/Ab Rapid Test (CTK Biotech Inc.) alebo HIV-1/2 Ag/Ab Combo Rapid Test - diagnostické súpravy pre kombinovanú imunoanalýzu séra, plazmy alebo plnej krvi na antigén HIV -1 p24, ako aj protilátky (IgG, IgM, IgA) na oba typy HIV. K dnešnému dňu sú recenzie lekárov o tomto type rýchleho testovania protichodné a ich výsledky sa zjavne často líšia od údajov laboratórneho výskumu.

Dá sa rýchlym testom na HIV dôverovať?

V tejto súvislosti vyvstáva prirodzená otázka týkajúca sa diagnostickej hodnoty výsledkov hodnotiacich štúdií vykonaných pomocou diagnostických systémov na rýchlu detekciu vírusu imunodeficiencie.

Spoľahlivosť a presnosť rýchleho testu na HIV je podľa informácií od ich výrobcov stanovená na úrovni 99 – 99,5 %. Ale podľa výskumu môže byť toto číslo oveľa nižšie.

V súčasnosti najspoľahlivejšie výsledky rýchleho testu na HIV poskytujú imunochromatografické testy. Keď je na indikátore vizualizovaná jedna čiara - kontrolná čiara, rýchly test na HIV je negatívny. Reaktívny výsledok, to znamená, že rýchly test na HIV je pozitívny (keď má indikátor dve čiary - farbu a kontrolu), považujú všetci odborníci za predbežný a je potrebné podstúpiť opakované testovanie - výskum v laboratóriu, kde sú iné používajú sa presnejšie metódy, najmä imunoblot .

Ak bolo testovanie vykonané nesprávne, indikátor môže ukazovať iba jeden pás (bez kontroly), čo možno považovať za chybu. Potom sa odporúča znova otestovať s novou súpravou. Jednou z možností, ako potvrdiť reaktívne výsledky, je okamžite vykonať druhý rýchly test od iného výrobcu. Ak druhý test nie je reaktívny, možno predpokladať, že osoba nie je infikovaná. Ale keď je druhý test pozitívny, potom je pravdepodobné, že došlo k infekcii.

Ešte raz treba zdôrazniť, že všetky pozitívne výsledky rýchlych hodnotiacich testov – najmä ak sa použije rýchly test na HIV zo slín OraQuick – musia byť potvrdené (alebo vyvrátené) krvnými testami v špecializovanom laboratóriu.

Odvtedy prešla testovacia technológia významným vývojom a je k dispozícii mnoho nových a vylepšených testovacích systémov na výskumné aj klinické účely. Pretože infekciu HIV nemožno liečiť, pokiaľ nie je stanovený stav HIV, je dôležité pochopiť, aké testy sú k dispozícii a aké sú ich obmedzenia.

Normálny testovací postup

„V roku 1985 bolo hlavným účelom testovania skenovanie zásob krvi,“ spomína Steve Morin, riaditeľ Kalifornskej univerzity v San Franciscu.

V tom čase neexistovali žiadne spôsoby liečby infekcie HIV. Nikto tiež nevedel, či sa u osoby s HIV vždy rozvinie AIDS a ako dlho môže trvať, kým sa to stane.

Jedinými lekárskymi opatreniami bola liečba oportúnnych chorôb, ktoré sa objavili pri oslabení imunitného systému. Ľudia teda neboli motivovaní zisťovať svoj HIV status.

Zároveň mnohí ľudia, ktorí si mysleli, že sú ohrození, chceli vedieť, či majú HIV. Podľa Morina to viedlo k

"Obáva sa, že ľudia, ktorí chcú vedieť, či majú infekciu, začnú darovať krv na testovanie."

Aby sa táto možnosť vylúčila, federálne a regionálne vlády otvorili alternatívne testovacie miestnosti, kde by ľudia mohli zistiť svoj HIV status. Opäť platí, že primárnym cieľom systému verejného zdravotníctva pri testovaní bola „prevencia... zabrániť ľuďom v prenose vírusu na niekoho iného“.

Ale s príchodom profylaxie na prevenciu oportúnnych infekcií a neskôr antiretrovírusovej liečby sa ciele testovania zmenili. sa stala podmienkou liečby a zároveň prostriedkom prevencie.

Hoci sa technológia odvtedy výrazne zmenila, testovanie vo všeobecnosti prebieha podľa rovnakých postupov ako v roku 1985.

Infekciu HIV potvrdzujú dva rôzne testy – skríningový test a potvrdzujúci test. V nedávnom článku pre Kalifornskú univerzitu v San Franciscu to vysvetľuje výskumník z Marylandskej univerzity Niel Constantine

„Skriningové testy majú veľmi vysokú citlivosť, zatiaľ čo potvrdzujúce testy majú vysokú špecifickosť. Vzhľadom na ich vysokú citlivosť môžu skríningové testy priniesť falošne pozitívne výsledky.“

Pretože skríningové testy majú potenciál falošne pozitívnych výsledkov, zvyčajne sa pri získaní počiatočného pozitívneho výsledku odoberie rovnaká vzorka krvi a skríningový test sa zopakuje druhýkrát, a ak je opäť pozitívny, až potom sa použije iný typ potvrdzujúceho vykonaný test. Potvrdzujúce testy sa vykonávajú len na vzorkách krvi, ktoré sú opakovane pozitívne (sú „reaktívne“).

Kombinácia dvoch rôznych typov testov zabezpečuje, že získané výsledky sú „veľmi presné“. Konstantin poznamenáva, že technické chyby a zriedkavé biologické faktory nemožno úplne vylúčiť.

Najbežnejším skríningovým testom je enzýmová imunoanalýza (ELISA).

Typicky sa imunoblotting používa ako potvrdzujúci test. Presne rovnaká technológia (diagnostika pomocou ELISA a imunoblottingu) sa používa na odhalenie obrovského množstva chorôb, napríklad na diagnostiku lymskej boreliózy. V skutočnosti sú imunologické techniky, na ktorých sú tieto testy založené, také základné, že Sally Liska, vedúca laboratória verejného zdravia v San Franciscu, ich nazýva „sérológia 101“.

ELISA sa používa ako počiatočný skríningový test z dvoch dôvodov. Po prvé, má veľmi vysokú citlivosť. Po druhé, je pomerne lacný a ľahko sa používa. Liška dodáva:

„Spracovanie vzoriek pomocou ELISA je oveľa jednoduchšie. Vyžaduje sa malý objem krvi. Proces je menej náročný na prácu. Je to oveľa automatizovanejšie."

V súčasnosti rôzni výrobcovia vyrábajú viac ako 40 rôznych testovacích systémov pre HIV ELISA.

Len malý počet z nich je schválených na použitie v Spojených štátoch a niektoré testy sú schválené len na výskumné účely. Tieto testovacie systémy využívajú umelo vytvorené HIV proteíny, ktoré „chytia“ špecifické protilátky, ktoré telo produkuje ako odpoveď na vírusové proteíny. Keď sa protilátky zachytia, vysvetľuje Constantine, „možno ich zistiť pomocou činidiel, ktoré sa používajú v spojení s indikátorom, ako je enzým, ktorý spôsobuje zmenu farby. Farebné zmeny sníma stroj, ktorý určí výsledok.

Imunoblotting funguje podobným spôsobom, ale používa elektrické pole na rozlíšenie rôznych zložiek na základe ich molekulovej hmotnosti. To umožňuje detegovať protilátky proti špecifickým vírusovým antigénom, ktoré sú potom znázornené na papieri ako rozlíšiteľné „pruhy“. Imunitný blotting podľa Lisku:

"Trochu náročnejšie na vykonanie... a oveľa náročnejšie na prácu." Imunitný blotting je tiež menej citlivý, dodáva, takže by sa „nikdy nemal používať samostatne“.

Imunoblotting je najbežnejším potvrdzujúcim testom, ale na tento účel boli vyvinuté aj iné testy, ako napríklad nepriamy fluorescenčný test na protilátky alebo rádioimunotest. „Keď sú tieto veľmi špecifické testy vykonané a interpretované správne, neprinášajú falošne pozitívne výsledky,“ píše Constantine.

„Obdobie okna“ bezprostredne po infekcii

Hlavnou nevýhodou testovania protilátok je „obdobie okna“, čo je obdobie, počas ktorého telo vytvorí protilátky ako odpoveď na infekciu. Štandardné testy HIV nezistia samotný vírus, ale protilátky, ktoré telo produkuje. Predtým, ako telo vytvorí protilátky, osoba môže mať HIV a preniesť vírus na iných bez negatívneho testu na protilátky HIV.

Keď boli schválené prvé testy HIV, obdobie okna sa pohybovalo od 6 do 12 týždňov, no novšie technológie dokážu odhaliť nižšie hladiny protilátok, takže testy môžu byť pozitívne skôr.

„Moderné testovacie systémy dokážu u väčšiny ľudí odhaliť infekciu HIV za 3-5 týždňov,“ píše Konstantin. „To platí pre všetky testovacie systémy ELISA aj pre rýchle testy. Niektoré testy s väčšou pravdepodobnosťou ukážu pozitívny výsledok po 3 týždňoch, ale celkovo sú všetky rovnocenné.“ Vysvetľuje však, že to „závisí od jednotlivca (ktorý nemusí vytvárať protilátky tak rýchlo ako ostatní).

Testy, ktoré nepoužívajú krv

Predtým sa všetky testy vykonávali na krvi. Nedávno boli vyvinuté testovacie systémy na detekciu protilátok v slinách a moči. Orálny test OraSure, ktorý bol ako prvý schválený na použitie v Spojených štátoch, sa riadi skríningovým/potvrdzovacím protokolom ako ostatné testy HIV. Toto nie je celkom test slín, ale používa sa malé zoškrabanie tekutiny z ďasien.

Hlavnou výhodou takýchto testov je, že zákrok je neinvazívny, čo je pre mnohých pacientov pohodlnejšie, a takéto testy možno použiť na miestach, kde odber krvi nie je možný z hygienických alebo praktických dôvodov. Boli vyvinuté aj testy moču, ktorým sa však nevenuje taká pozornosť ako testom zo slín, pretože nebol schválený žiadny potvrdzujúci test moču a na potvrdenie výsledku sa stále musí podávať krv.

Rýchle testy na HIV

Ďalšou novinkou boli rýchle testy na HIV. Pri konvenčných testoch sa vzorka krvi odošle do laboratória a v dôsledku toho môže pacient čakať týždeň, kým dostane výsledok. Rýchle testy sa robia na mieste a výsledky je možné získať do pol hodiny. Rovnako ako pri ELISA, pozitívny výsledok vyžaduje potvrdzujúci imunoblotový test.

Výhodou rýchlych testov je, že eliminujú situáciu, keď sa pacient nevracia pre výsledok. Na anonymných miestach testovania HIV je miera nevracania pacientov pomerne nízka, ale v zariadeniach, ako sú kliniky STI, sa asi 30 % pacientov nevráti, aby zistili výsledok.

Podľa Konstantina rýchle testy

„Ukázalo sa, že sú rovnako presné ako testy ELISA za predpokladu, že ich vykonáva starostlivo a kvalifikovaný personál. Možnosť technickej chyby pri takýchto testoch je paradoxne vyššia, pretože postup sa zdá byť príliš jednoduchý a používateľ môže byť pri jeho vykonávaní neopatrný.“

Na prekonanie tohto problému majú teraz mnohé rýchle testy zabudované monitorovacie systémy, ktoré by mali určiť, či bol dodržaný testovací postup.

Stanovenie akútneho štádia infekcie HIV

Krátko po infikovaní HIV sa u niektorých pacientov vyvinie akútna (alebo „primárna“) infekcia HIV – obdobie ochorenia s príznakmi podobnými chrípke, ako je horúčka. Chrípka a mnohé ďalšie infekcie môžu spôsobiť podobné príznaky. Mnohí vedci sa domnievajú, že počas tohto obdobia by mala byť osobe predpísaná liečba, samozrejme, za predpokladu, že bola stanovená správna diagnóza. Kontroverznou otázkou zároveň zostáva liečba akútnej infekcie HIV.

V súčasnosti sa na potvrdenie podozrenia na akútnu infekciu HIV odporúča testovanie na HIV RNA (PCR, test vírusovej záťaže). Bežný test na protilátky neodhalí akútnu infekciu HIV, pretože sa vyskytuje počas „obdobia okna“, keď sa protilátky ešte nevytvárajú.

Testy vírusovej záťaže môžu poskytnúť falošne pozitívne výsledky. Analýza výskumných údajov publikovaných v roku 1999 v časopise American Family Physician však naznačuje, že je celkom možné presne určiť akútne obdobie: „Počas obdobia akútnej infekcie HIV ukazuje test na vírusovú RNA výsledok viac ako 50 000 kópií / ml. Vyskytli sa tri prípady falošne pozitívnych testov HIV-1 RNA, ale vo všetkých prípadoch boli pacienti asymptomatickí a mali vírusovú záťaž nižšiu ako 2 000 kópií/ml. Prítomnosť vysokého titra HIV-1 RNA (viac ako 50 000 kópií/ml) pri absencii protilátok proti HIV umožňuje diagnostiku akútnej infekcie HIV.“

Doteraz nebol schválený žiadny test vírusových častíc na diagnostiku infekcie HIV u pacientov. V Spojených štátoch však schválili test na prítomnosť vírusu na skríning veľkých objemov darcov krvi. Ak test vírusovej záťaže nie je dostupný, pri podozrení na akútnu infekciu HIV sa odporúča testovanie na antigén p24, vírusový proteín. V každom prípade, po uplynutí obdobia okna by sa diagnóza mala potvrdiť štandardným testovaním protilátok.

ELISA so zníženou presnosťou

Na vedecké účely možno použiť testovacie systémy ELISA, ktorých presnosť bola zámerne podceňovaná. Takéto testy sa používajú, pretože hladiny protilátok po infekcii sledujú špecifický a predvídateľný vzor. 4-6 mesiacov po prenose HIV táto hladina prudko stúpa a potom dosiahne konštantnú úroveň – plató – ktorá zostáva nezmenená po mnoho rokov.

Moderné testovacie systémy ELISA dokážu odhaliť veľmi nízke hladiny protilátok. ELISA so zníženou presnosťou sa už nepoužívajú na diagnostiku medzi pacientmi. Vedci a lekári ich však môžu použiť, aby pochopili, či sa vírus nedávno preniesol alebo či ide o starú infekciu. Ak je infekcia nedávna, môže to ukázať menej citlivý test, ktorý sa stane pozitívnym až po 6 mesiacoch.

Konstantin sumarizuje svoj prehľad tým, že hovorí, že medzi rôznymi a epidemiologickými inštitúciami bol úplný konsenzus týkajúci sa testovania HIV:

"Testy protilátok sú takmer 100% citlivé a asi 99% špecifické."

Táto úroveň presnosti testovania bola preukázaná vo veľkom počte štúdií, vrátane pravidelných hodnotení spoľahlivosti komerčných testovacích súprav na trhu, ktoré vykonáva Svetová zdravotnícka organizácia.

Tento abstrakt napísal Bruce Mirkinem pre americké Centrá pre kontrolu a prevenciu chorôb (CDC) v reakcii na zmeny v oficiálnych testovacích pokynoch v tejto krajine. Tento článok hovorí o spoľahlivosti testov a nových testovacích systémoch, ktoré sa nedávno začali registrovať v USA.

Popis

Príprava

Indikácie

Interpretácia výsledkov

Popis

Metóda stanovenia Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).

Študovaný materiál Krvné sérum

Možnosť návštevy domova

Kombinovaná detekcia protilátok proti HIV typu 1 a 2 a antigénu HIV p24, kvalitatívny test.

Pozornosť. V prípade kladných a pochybných reakcií sa môže lehota na vydanie výsledkov predĺžiť na 10 pracovných dní. HIV (vírus ľudskej imunodeficiencie), ktorý spôsobuje AIDS (syndróm získanej imunodeficiencie), patrí do rodiny retrovírusov. Prenáša sa z človeka na človeka použitím kontaminovaných ihiel a injekčných striekačiek na intravenózne podanie drog alebo terapeutické postupy počas sexuálneho kontaktu, heterosexuálneho aj homosexuálneho. K prenosu vírusu môže dôjsť transfúziou infikovanej krvi a jej produktov, darovaním orgánov alebo semennej tekutiny a medzi zdravotníckymi pracovníkmi - poranením kontaminovanými ihlami alebo nástrojmi. Infekcia HIV je možná prenosom z infikovanej matky na dieťa (vertikálna cesta), aj keď moderné metódy prevencie pomocou antiretrovírusovej terapie pri dodržiavaní všetkých odporúčaní môžu toto riziko znížiť na minimum.

Proces interakcie vírusu s bunkou zahŕňa niekoľko fáz: väzba vírusu na bunku, jeho uvoľnenie z obalu, prienik do cytoplazmy, syntéza DNA pomocou vírusovej RNA, integrácia vírusovej DNA do genómu hostiteľskej bunky. Potom začína latentné štádium infekcie. V tomto stave môže provírusová DNA nejaký čas existovať bez toho, aby vykazovala aktivitu a bez ovplyvnenia života hostiteľskej bunky. Zatiaľ čo nedochádza k expresii vírusových proteínov, neexistuje žiadna imunitná odpoveď na vírus. Protilátky proti HIV, ktoré charakterizujú imunitnú odpoveď organizmu, sa objavujú po aktivácii vírusovej DNA a začiatku aktívnej reprodukcie vírusu. Trvanie latentného obdobia závisí od množstva faktorov vrátane individuálnych genetických vlastností organizmu.

Protilátky proti HIV sa môžu objaviť od druhého týždňa po infekcii; ich obsah sa zvyšuje v priebehu 2-4 týždňov a zostáva mnoho rokov. U 90-95% infikovaných ľudí sa objavia v prvých troch mesiacoch po infekcii, u 5-9% - v období od troch do šiestich mesiacov, u 0,5-1% - neskôr.

V prvých týždňoch infekcie, ešte pred objavením sa protilátok proti vírusu (t.j. pred sérokonverziou), možno vo vzorkách séra alebo plazmy detegovať prítomnosť antigénov HIV, vrátane jeho kapsidového proteínu p24. Neskôr, po sérokonverzii, sa zvyčajne stáva nedetegovateľným.

Kombinované testovacie systémy 4. generácie, medzi ktoré patrí HIV Ag/Ab Combo test (Architect, Abbott), detegujú ako protilátky proti HIV typu 1 a 2, tak aj HIV p24 antigén, čo umožňuje včasné odhalenie infekcie. Medzi špeciálne charakteristiky skríningového testu používaného v laboratóriu INVITRO na zistenie infekcie HIV patrí vysoká špecifickosť štúdie (> 99,5 %); Test je 100% citlivý na protilátky charakteristické pre obdobie sérokonverzie a citlivosť testu na antigén p24 je približne 18 pg/ml.

Postup vykonania laboratórneho vyšetrenia na HIV je prísne regulovaný nariadeniami Ministerstva zdravotníctva Ruskej federácie a zahŕňa štádium skríningovej (výberovej) štúdie prítomnosti protilátok proti HIV pomocou enzýmovej imunoanalýzy (ELISA). metódy schválené na použitie, a štádium overenia (potvrdenia) podrobnejšieho štúdia v laboratóriu mestského AIDS centra. Treba poznamenať, že ani tie najlepšie skríningové ELISA systémy nezaručujú 100% špecifickosť, to znamená, že existuje určitá pravdepodobnosť získania nešpecifických, falošne pozitívnych výsledkov spojených s charakteristikami krvného séra pacienta. Pozitívny výsledok skríningového vyšetrenia ELISA preto nemusí byť potvrdený v konfirmačných testoch, po ktorých bude pacientovi daný negatívny alebo neurčitý výsledok. Ak je výsledok potvrdzujúcej štúdie neistý, testovanie by sa malo opakovať po 2-3 týždňoch.

Laboratórna diagnostika infekcie HIV u detí narodených matkám infikovaným HIV má svoje vlastné charakteristiky. Materské protilátky proti HIV (trieda IgG) môžu cirkulovať v ich krvi až 18 mesiacov od okamihu narodenia. Neprítomnosť protilátok proti HIV u novorodencov neznamená, že vírus neprenikol cez placentárnu bariéru. Deti matiek infikovaných HIV sa podrobia laboratórnemu diagnostickému vyšetreniu do 36 mesiacov po narodení.

Príprava

Nevyžaduje sa žiadna špeciálna príprava. Odporúča sa odobrať krv najskôr 4 hodiny po poslednom jedle. Všeobecné odporúčania na prípravu na výskum možno nájsť. Test na zistenie antigénu a protilátok proti HIV je vhodné vykonať najskôr dva týždne po možnej infekcii, v prípade negatívneho výsledku test zopakovať po troch a šiestich týždňoch. Žiadosti o výskum v INVITRO LLC sa vypĺňajú pomocou pasu alebo dokumentu, ktorý ho nahrádza (migračná karta, dočasná registrácia v mieste bydliska, preukaz vojenského personálu, osvedčenie z pasového úradu v prípade straty pasu, registračná karta od hotel). Predložený dokument musí nevyhnutne obsahovať informácie o dočasnej alebo trvalej registrácii v Ruskej federácii a fotografiu. V prípade absencie pasu (dokladu, ktorý ho nahrádza) má pacient právo vyplniť anonymnú žiadosť o darovanie biomateriálu. Pri anonymnom vyšetrení, prihláške a vzorke biomateriálu prijatej od klienta je pridelené číslo, ktoré pozná len pacient a zdravotnícky personál, ktorý objednávku zadal. ! Výsledky štúdií vykonaných anonymne nie je možné odovzdať na hospitalizáciu, odborné vyšetrenia a nepodliehajú registrácii v ORUIB.

Indikácie na použitie

Zväčšené lymfatické uzliny vo viac ako dvoch oblastiach.
Leukopénia s lymfopéniou.
Nočné potenie.
Náhla strata hmotnosti neznámej príčiny.
Hnačka trvajúca viac ako tri týždne s neznámou príčinou.
Horúčka neznámej príčiny.
Plánovanie tehotenstva.
Predoperačná príprava, hospitalizácia.
Detekcia nasledujúcich infekcií alebo ich kombinácií: tuberkulóza, manifestná toxoplazmóza, často recidivujúca herpesvírusová infekcia, kandidóza vnútorných orgánov, opakovaná neuralgia herpes zoster, zápal pľúc spôsobený mykoplazmami, pneumocystis alebo legionella.
Kaposiho sarkóm v mladom veku.
Príležitostné sexuálne kontakty.

Interpretácia výsledkov

Interpretácia výsledkov výskumu obsahuje informácie pre ošetrujúceho lekára a nie je diagnózou. Informácie v tejto časti by sa nemali používať na samodiagnostiku alebo samoliečbu. Lekár robí presnú diagnózu pomocou výsledkov tohto vyšetrenia a potrebných informácií z iných zdrojov: anamnéza, výsledky iných vyšetrení atď.

Jednotky merania v nezávislom laboratóriu INVITRO: kvalitatívny test. Forma prezentácie výsledkov: pri absencii protilátok proti HIV 1 a 2 a antigénu p24 je odpoveď „negatívna“. Ak sa pri skríningovom enzýmovom imunosorbentnom teste zistia protilátky proti HIV alebo antigén, vzorka séra sa odošle na potvrdenie imunoblotovaním do mestského centra AIDS, ktoré overí pozitívne a neurčité výsledky.

Pozitívny výsledok:

infekcia HIV;
falošne pozitívny výsledok vyžadujúci opakované alebo dodatočné štúdie *);
štúdia nie je informatívna u detí mladších ako 18 mesiacov narodených matkám infikovaným HIV.

*Špecifickosť skríningového testovacieho systému Protilátky proti HIV 1 a 2 a HIV antigén 1 a 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott), podľa odhadov poskytnutých výrobcom činidla, je približne 99,6 % v bežnej populácii aj v skupina pacientov s potenciálnymi interferenciami (infekcie HBV, HCV, rubeola, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E. coli, Chl. trach. atď., autoimunitné ochorenia (vrátane reumatoidnej artritídy, prítomnosť antinukleárnych protilátok) , tehotenstvo, zvýšené hladiny IgG, IgM, monoklonálne gamapatie, hemodialýza, viacnásobné transfúzie krvi).

HIV je nevyliečiteľná choroba, ktorej diagnostika je možná až po krvných testoch, ktorých správnosť nemožno nikdy spochybniť. Dá sa im veriť?

HIV je jednou z najstrašnejších chorôb našej doby, pretože na ňu nebol nikdy vynájdený liek. Zároveň je potrebné povedať, že iba včasné testy umožňujú nielen uistiť, ale aj začať liečbu v počiatočných štádiách.

Na vykonanie kompletného testu HIV sú potrebné rôzne testy. Navyše iba lekári môžu predpisovať, ktoré z nich budú v danom čase najúčinnejšie. Okrem toho je spoľahlivosť vykonaných testov nepochybná. Veď len s ich pomocou vieme s 90-99% presnosťou zistiť, či došlo k infekcii HIV alebo nie.

Pri vykonávaní výskumu budú lekári brať do úvahy možnosť chyby, ako aj prítomnosť rôznych faktorov, ktoré môžu skresliť presnosť výsledkov. Okrem toho rôzne testy umožňujú získať presný výsledok týkajúci sa HIV. Aká by bola najspoľahlivejšia analýza? Medzi najpresnejšie testy patrí enzýmový imunotest na HIV. Spoľahlivosť získaných údajov nebude vyvolávať pochybnosti, keďže vychádza z množstva potvrdených faktov. Frekvencia výskumu je navyše na prvom mieste. Konkrétne, po akom čase sa uskutoční prvá štúdia.

Malo by byť zrejmé, že testovanie ELISA umožňuje rýchlo odhaliť protilátky počas diagnostiky infekcie HIV. Najčastejšie sa vykonáva v prvom mesiaci po podozrení na infekciu. Uchyľujú sa k nemu, keď je potrebné diagnostikovať tak tých, ktorí diagnózu predpokladajú, ako aj tých, ktorí sa chcú dať otestovať.

Uskutočnenie testu ELISA 2 týždne po podozrení na infekciu bude príliš skoro, pretože účinnosť bude nevýznamná. Je to spôsobené tým, že sa vytvárajú protilátky na ochranu tela pred vírusmi. Svoju koncentráciu dosahujú až mesiac po pravdepodobnej infekcii.

Ako dlho trvá, kým sa objavia prvé príznaky? Okrem toho môže trvať niekoľko týždňov alebo mesiacov, kým sa objavia prvé príznaky súvisiace s infekciou HIV.

Maximálna presnosť sa dosiahne až po mesiaci, keď protilátky dosiahnu požadovanú koncentráciu. Na získanie presnejšieho výsledku bude potrebné vykonať analýzu najskôr 3-4 mesiace po možnej infekcii.

HIV testovanie na základe počtu antigénov

Vykonanie testu HIV pomocou imunitného prenosu určí stav ľudského imunitného systému. Vedenie výskumu HIV zahŕňa presnú identifikáciu antigénov - to je. S jeho pomocou môžete zistiť, či je osoba infikovaná alebo nie.

Po akom období bude analýza účinná?

Infekcia vírusom ľudskej imunodeficiencie je vážna diagnóza. Chyby v diagnostike môžu viesť k katastrofálnym následkom. Test ELISA na HIV je najdostupnejšou výskumnou metódou, ale nie je vo všetkých prípadoch informatívna.

ELISA – enzýmová imunoanalýza. Účelom metódy ELISA je detekcia protilátok proti vírusu imunodeficiencie v biologickom materiáli. Pomocou tejto metódy môžete sledovať prítomnosť v kvapaline nie samotných vírusov, ale iba protilátok produkovaných v reakcii na ich prítomnosť. Enzýmová imunoanalýza je široko používaná v diagnostike STD. Pomáha identifikovať sexuálne prenosné choroby.

Existuje niekoľko typov ELISA: priama verzia, nepriama verzia, sendvičová metóda. V každom prípade je technika založená na stanovení prítomnosti protilátok, ktoré slúžia ako indikátor prieniku cudzieho agens. Na identifikáciu týchto „značiek“ sa biologická zložka ošetrí enzýmami.

Enzýmová imunoanalýza stanovuje protilátky s presnosťou 96–98 %, chyba je nevýznamná. Ide o 2 – 4 %.

ELISA – metóda diagnostiky HIV

ELISA test na HIV je prvým stupňom diagnózy. Antigény vírusu imunodeficiencie sú proteíny p24, p15, p17, p31 a glykoproteíny gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Na detekciu vírusového proteínu sa odoberie vzorka krvi zo žily. Vzorka odoslaná na krvný test ELISA sa ošetrí reagenciami na enzýmovú imunoanalýzu. Sérum sa izoluje z krvi. Ak sa počas štúdie zistia, znamená to, že vírus je už prítomný v krvi.

Krv sa daruje striktne na prázdny žalúdok. 2 dni pred testom sa neodporúča jesť tučné jedlá ani piť alkohol. Mali by ste prestať užívať antivírusové lieky na 14 dní.

Výhody metódy:

relatívne nízke náklady;
vysoká stabilita činidiel;
vysoká citlivosť;
krátke trvanie;
minimálny vplyv ľudského faktora.

Moderné testovacie systémy ELISA sú vyrábané podľa medzinárodných štandardov. To zvyšuje presnosť metódy.

Enzýmová imunoanalýza nie vždy poskytuje spoľahlivé výsledky. Po vstupe vírusu do krvi začína latentné (skryté) štádium vývoja. Obdobie, kým sa vírusy začnú množiť a protilátky sa ešte nevytvoria, sa nazýva „čas séronegatívneho okna“. V tejto fáze nemá zmysel robiť ELISA. Ak dôjde k infekcii, výsledkom bude . Ako rýchlo sa vírus odhalí, závisí od toho, koľko nebezpečných buniek sa dostalo do tela. V prípade nechráneného pohlavného styku alebo transfúzie kontaminovanej krvi bude toto obdobie minimálne.

Pre vysokú spoľahlivosť HIV ELISA sa test vykonáva trikrát. Termíny na vykonanie testu ELISA na vírus ľudskej imunodeficiencie:

6 týždňov po pravdepodobnom kontakte,
za 3 mesiace,
o šesť mesiacov neskôr.

ELISA 4. generácie na HIV je metóda, ktorá je najinformatívnejšia v počiatočných štádiách infekcie. Môže sa vykonať už 1 mesiac po podozrení na infekciu. Test je drahý v porovnaní s analógom 3. generácie. Preto sa vo verejných zdravotníckych zariadeniach používa ako doplnková diagnostická metóda. Bezplatne sa vykonáva test 3. Ak na základe jeho výsledkov nemožno dať jednoznačnú odpoveď, pacient je odoslaný na test ELISA 4. generácie.

Dôležité! Ihneď po infekcii sa človek stane nákazlivým. Pre ostatných je nebezpečný, aj keď o svojej diagnóze ešte nevie!

Ak test ELISA odhalí protilátky proti antigénom HIV, musia sa vykonať ďalšie štúdie. Toto zahŕňa . Spoľahlivosť tejto metódy je 80%. PCR testuje krv, spermu a vaginálny výtok. Biologická tekutina sa rozloží v lekárskom reaktore a potom sa spracuje enzýmami. V dôsledku toho sa získajú údaje o koncentrácii buniek HIV v kvapalnom médiu. Vzhľadom na veľkú chybu (20%), ak je výsledok pozitívny, dodatočne sa vykonáva imunoblotting.

Ďalšou fázou diagnostiky je Combo test (alebo imunoblotting). Ide o vysoko citlivý test (spoľahlivosť 98 %), ktorý sa vykonáva, ak sú výsledky ELISA po 6 mesiacoch nejednoznačné.

Dekódovanie výsledkov ELISA

Doba dešifrovania sa pohybuje od 24 do 48 hodín. Ak je potrebné urýchlene získať informácie (vyžaduje sa chirurgický zákrok), dekódovanie sa uskutoční do 2 hodín. Provinčné lekárske strediská nemajú vždy potrebné reagencie. Vzorka sa odoberie na mieste aplikácie, následne sa prevezie do regionálneho centra. Za takýchto okolností možno výsledok zistiť za 1-2 týždne.

Výsledok enzýmového imunotestu môže byť pozitívny alebo negatívny; nie sú žiadne iné možnosti.

Aj keď bol výsledok počiatočného a opakovaného testu ELISA pozitívny, pacient nemôže byť rozpoznaný ako infikovaný HIV. S výhradou chyby. Dôvody falošne pozitívneho výsledku:

chronické choroby;
dlhodobé infekčné choroby;
tehotenstva.

Výsledok analýzy by sa preto mal objasniť dodatočnými štúdiami.

Ak je imunoblotting HIV pozitívny (reaktívny), osoba sa považuje za infikovanú HIV, čo znamená, že je zdravá.

V priebehu času sa bunky vírusu prispôsobia predpísaným liekom. Na kontrolu sa test ELISA periodicky opakuje.

Niekedy imunoblotting ukazuje falošne negatívny výsledok. Je extrémne zriedkavé mať vírus imunodeficiencie 6 mesiacov (alebo viac). To je možné, ak sa do krvi dostane malé množstvo vírusových buniek. V 0,5 % z celkového počtu prípadov je možné infekciu diagnostikovať až po roku. V 99,5%, do šiestich mesiacov po infekcii, ELISA prinesie spoľahlivý výsledok.

Aj pri vysoko presných štúdiách stále existuje 2% pravdepodobnosť chyby. Netreba zabúdať ani na ľudský faktor. Aby sa eliminovala možnosť chyby, test je možné vykonať v 2 rôznych inštitúciách.